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逆转录酶

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逆转录酶

RNA-dependent

  我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER, MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min。我想请教每一步的原理,为什么这么做?

  42℃?反转录1hr,99℃灭活反转录酶5min这程序能反转录得到cDNA吗?

  操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水 65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开; 再加dNTP,RNaseA,BUFFER, MTV逆转录酶, 反应25℃10min:这一步是让反转录引物(oligodT,随机引物)和模板RNA退火结合 37℃60min:这一步是反转录酶的工作温度 70℃10min:这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA

  Nucleotidyltransferase,deoxyribonucleate, RNA-dependent

  意大利在1943年首次使用了杀虫剂DDT(双氯苯基三氯乙烷),成功地消灭了斑疹伤寒.1944年,氯丹作为DDT的增补剂而使用.长期使用化学药剂使家蝇、蚊子出现了抗药性,至1951年底,DDT、氯丹、七氯、六六六都已列入失效的化学药物名单,而家蝇、蚊子却大量繁殖.DDT不溶于水,与脂肪酸、甘油一样通


点击次数:  更新时间:2019-09-15 21:14   【打印此页】  【关闭
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